实时荧光定量PCR在医疗领域的应用

实时荧光定量PCR在医疗领域的应用 

一、感染性疾病的诊断

1. 用于各种感染性疾病的早期诊断

PCR在医学检验学中最有价值的应用领域就是对感染性疾病的诊断。从理论上来说只要样品中有一个病原体存在，PCR仪器就可以检测到。与病原体抗体检测方法比较具有早期、快速诊断等优点。定量PCR成功的解决了“窗口期”问题，可判断疾病是否处于隐性或亚临床状态。定量PCR研究资料表明，病原体数量与感染性疾病病情的轻重程度、传染性及治疗效果均有相关性。

2. 病原体含量分析

 1）疗效考评          2）指导制定感染性疾病的合理治疗方案

 3）了解感染性疾病病人用药后病情的变化情况

3. 病毒性疾病中病毒的耐药性变异株的测定，为疾病的治疗进行指导

4. HLA分型，取代传统电泳方法

二、遗传病诊断

遗传性疾病根据其遗传方式分为单基因遗传病和多基因遗传病。因此，在诊断遗传性疾病时又分为等位基因检测、多基因遗传病的突变检测和基因表达异常所致遗传病检测。如：

1. 地中海贫血  

基因的突变和缺失均会引起各种珠蛋白的表达不平衡，用荧光定量PCR检测各种珠蛋白基因表达差异，是地中海贫血诊断的有效手段。

2. 应用于胚胎植入前遗传疾病的诊断

三、肿瘤检测

1. 肿瘤相关基因表达的检测

包括：癌基因、抗癌基因、肿瘤转移基因和转移抑制基因。

例如：乳腺癌与12种肿瘤基因相关，包括：mam、PTP、mamB、CEA、CK19、VEGF、erbB2、mucl、c-myc、p9、vim、Ki67

2. 肿瘤标志物的检测

如：癌胚抗原、标志性酶、同工酶、抗体、激素、细胞因子和受体的检测。端粒酶基因是今年最新发现的肿瘤的标志物。

3. 肿瘤耐药基因的检测（MDR）

在急性白血病MDRI基因表达的研究中，发现初始组的MDR表达水平为0.22±0.01，缓解组为0.25±0.07，而难治复发组0.44±0.07。

在大肠癌MDR基因组表达的研究中，发现化疗MDR的表达0.5，化疗中0.50-0.97，而高分化腺高于中、低分化腺癌。

4. 与肿瘤相关的病毒基因

例如：HBV病毒与肝癌的发病有一定的相关性，EB病毒与鼻咽癌的发病有一定的关系等。

四、药物及医疗相关

1. 新药的开发研究        2. 超早期感染的用药和治疗研究与开发

3. 新临床诊断及检验试剂的开发            4. 个人基因型与药物疗效之间的关系

5. 药物疗效的研究

五、与疾病相关

1. 新的预后指标的研究    2. 合理用药的研究      3. 建立病原体分子诊断标准

4. 疾病的发病监控研究

5. 研究ELISA方法的漏检率